共聚焦顯微系統(tǒng)的基本原理

共聚焦顯微系統(tǒng)技術(shù)是近十幾年迅速發(fā)展起來的一項(xiàng)高新研究技術(shù)，目前應(yīng)用領(lǐng)域擴(kuò)展到細(xì)胞學(xué)、微生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、遺傳學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、生理和病理學(xué)等學(xué)科的研究工作中，成為現(xiàn)代生物學(xué)微觀研究的重要工具。

共聚焦顯微鏡利用放置在光源后的照明針孔和放置在檢測器前的探測針孔實(shí)現(xiàn)點(diǎn)照明和點(diǎn)探測，來自光源的光通過照明針孔發(fā)射出的光聚焦在樣品焦平面的某個(gè)點(diǎn)上，該點(diǎn)所發(fā)射的熒光成像在探測針孔內(nèi)，該點(diǎn)以外的任何發(fā)射光均被探測針孔阻擋。照明針孔與探測針孔對(duì)被照射點(diǎn)或被探測點(diǎn)來說是共軛的，因此被探測點(diǎn)即為共焦點(diǎn)，被探測點(diǎn)所在的平面即為共焦平面。計(jì)算機(jī)以像點(diǎn)的方式將被探測點(diǎn)顯示在計(jì)算機(jī)屏幕上，為了產(chǎn)生一幅完整的圖像，由光路中的掃描系統(tǒng)在樣品焦平面上掃描，從而產(chǎn)生一幅完整的共焦圖像。只要載物臺(tái)沿著Z軸上下移動(dòng)，將樣品新的一個(gè)層面移動(dòng)到共焦平面上，樣品的新層面又成像在顯示器上，隨著Z軸的不斷移動(dòng)，就可得到樣品不同層面的連續(xù)光切圖像。

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